SD DNA聚合酶是一种新型DNA聚合酶,该酶具有类似Bst聚合酶的强烈的链置换活性和类似Taq DNA聚合酶的耐热性。SD DNA 聚合酶可耐受90℃高温(短暂耐受92℃),且具有5'-3'聚合酶活性和5'-3'链置换活性,无外切酶活性,扩增速度1kb/min,最佳反应温度为70℃,这些特征使得该酶广泛适用于热变性PCDR (Polymerase Chain Displacement Reaction)、LAMP反应、长片段扩增、富含GC片段扩增,还可用于全基因组测序(WGA)、单细胞测序和NGS建库等领域。
SD DNA聚合酶在搭配Taq DNA聚合酶的组合下可进行TaqMan探针的切割,用于qPCDR的扩增。这种qPCDR 的新型方案将槽式PCR的高灵敏特性放置于单管、一步扩增完成,这种检测策略比qPCR灵敏度高10-100 倍,并且用时更短。
HaiGene自主研发的
SD2.0 DNA聚合酶是在SD酶的基础上筛选改造而成,主要优势是提高了其耐热性,可耐受95℃高温,这一性能使其对复杂样本的变性更为充分,有利于PCDR扩增时,高灵敏度的检测复杂靶标基因。由于SD2.0 Pol可完全替代原SD Pol,因此SD Pol将会逐步停产。并且,SD2.0 聚合酶提供更为丰富的版本,包括极其严谨的热启动酶Chemi-SD2.0(PCDR首选酶)和适配体封闭的严谨型热启动酶Apta-SD2.0(适用热变性的LAMP和PCDR)。
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SD Polymerase |
SD2.0 Polymerase |
HotStart Apta-SD2.0 |
HotStart Chemi-SD2.0 |
| 耐热性 |
90℃ |
95℃ |
95℃ |
95℃ |
| 热启动形式 |
无 |
无 |
>55℃ 释放酶活 |
95℃ 5min 释放酶活 |
| 封闭效率 |
无 |
无 |
30℃以下封闭90% |
50℃以下封闭100% |
| PCDR扩增 |
适用 |
适用 |
适用 |
推荐 |
| LAMP扩增 |
适用 |
推荐 |
推荐 |
不适用 |
活性定义
1unit指在70°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
应用
等温扩增、LAMP、热变性LAMP、tHDA和RCA、PCDR、全基因组测序、单细胞测序、NGS文库构建。
功能测试
(该实验结果来自HaiGene实验室,未经允许,不得转载)